ATCC 9833 流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具强致病性，是 20 世纪 Hib 疫苗普及前儿童细菌性脑膜炎的首要致病菌，尤其易感染 5 岁以下婴幼儿，操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床儿童脑膜炎患者脑脊液样本，生物学特性代表 Hib 侵袭性感染株的典型表型，其荚膜多糖抗原（PRP）结构与临床流行株高度一致，是疫苗研发与效果评估的 “金标准参照”。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具荚膜与双因子营养依赖双重鉴别特征：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.6μm×0.8-1.6μm），单个或短链排列（无聚集生长，区别于聚集杆菌），无芽孢、无鞭毛，革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，染色时间控制 20-30 秒），荚膜染色后可见清晰肥厚的荚膜环绕菌体（荚膜厚度约 0.2-0.5μm，是区别于非荚膜型 NTHi 的关键特征）；
培养要求：兼性厌氧，需 5%-10% CO?环境促进生长，最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 双因子的选择性琼脂（需同时添加 X 因子：原卟啉 IX、V 因子：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，缺一不可），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成明显菌落），普通营养琼脂因缺乏 X/V 因子不生长（可作为双因子依赖与荚膜表型结合的教学案例）；
菌落形态：巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑黏稠、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.8-1.2mm），质地柔软，挑取时呈 “拉丝状”（因荚膜多糖分泌），无溶血现象（接种绵羊血琼脂无溶血环，区别于副溶血性嗜血杆菌）；菌落因荚膜保护呈 “光滑型”，肉眼观察易与其他荚膜型菌株混淆，需通过血清凝集试验确认 b 型血清型。
生化与药敏特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖（生化结果与 NTHi 一致，需结合荚膜血清型区分）；核心优势在于双重标准特性：一是荚膜特异性，其 b 型荚膜多糖仅与 Hib 特异性抗血清发生凝集（不与 a、c-f 型抗血清反应），是血清分型的标准模板；二是药敏标准化，对 Hib 疫苗普及前的临床常用药物（氨苄西林、头孢曲松）敏感（氨苄西林 MIC 0.12-0.25μg/mL），无天然耐药性，药敏结果可作为抗侵袭性感染药物筛选的基准值，同时其荚膜介导的吞噬抵抗能力稳定，是研究细菌侵袭机制的理想模型。
三、储存环境
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X/V 因子与荚膜保护剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>1 年）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 75% 以上，破坏荚膜结构与抗原性），保质期 5 年（因荚膜表型稳定，保质期长于非荚膜型菌株）；
甘油菌：直接 - 80℃保存，室温暴露 20 分钟致活力下降 55%，保质期 3 年，解冻后需一次性使用（反复冻融易导致荚膜多糖降解，影响抗原性）。
复苏后状态：复苏菌液（含 X/V 因子的巧克力肉汤培养）2-8℃冷藏 5 天内使用（荚膜菌株代谢较敏感，需避免长时间保存）；斜面培养物（含 X/V 因子的巧克力琼脂斜面）2-8℃冷藏 2 周内传代，传代需 5% CO?环境，使用前需镜检确认荚膜形态，并通过 Hib 特异性血清凝集试验验证血清型（确保荚膜抗原性未漂移）。
四、使用方法
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 含 X/V 因子的巧克力肉汤溶解，37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见带荚膜的球杆菌，且接种巧克力琼脂形成黏稠菌落时，通过 Hib 抗血清凝集试验（凝集效价≥1:64）确认血清型后使用（复苏后需严格验证荚膜抗原性，确保科研与质控准确性）。
传代培养：挑取巧克力琼脂上的光滑型单菌落（避免挑取边缘粗糙菌落，防止荚膜丢失），划线接种新鲜巧克力琼脂平板，37℃ 5% CO?培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤3 代（荚膜表型易因传代次数过多退化），每次传代后需同时进行血清凝集试验与荚膜染色，双重验证荚膜特性。
应用操作：
疫苗研究：作为 Hib 疫苗（如 PRP-T、PRP-OMP 疫苗）免疫原性评估的标准菌株，用于检测疫苗诱导产生的特异性抗体效价，验证疫苗保护效果；
侵袭性感染质控：验证儿童脑脊液、血液样本鉴定系统（质谱、PCR 荚膜基因检测）对 Hib 的检出准确性，确保重症感染快速诊断；
致病机制研究：用于荚膜多糖（PRP）介导的吞噬抵抗、血脑屏障穿透机制研究，及侵袭性感染相关毒力基因（如 hpd、iga 基因）功能分析；
试剂标准品：作为 Hib 抗原检测试剂（如胶体金试纸、ELISA 试剂盒）的标准品，校准试剂灵敏度与特异性，确保临床检测结果的一致性。
客服1