形态：革兰氏阴性短杆菌，显微镜下呈直杆状，两端钝圆，大小约 0.5-0.9μm×1.0-2.2μm，无芽孢，具周生鞭毛（H 抗原），可自主运动（显微镜下呈 “穿梭样” 运动，运动性较强）。在普通营养琼脂上形成直径 1.0-2.0μm 的乳白色半透明菌落，质地湿润、表面光滑，边缘整齐无锯齿；在 SS 选择性培养基上呈无色透明菌落（不发酵乳糖），多数菌株因产生硫化氢（H?S），菌落中心形成明显黑色斑点（可作为重要鉴别特征）；在麦康凯培养基上呈无色透明菌落（与发酵乳糖的大肠杆菌红色菌落显著区分）；在血琼脂培养基上多表现为 γ- 溶血（不溶血），少数菌株呈微弱 α- 溶血（草绿色溶血环），无 β- 溶血特性。
生理生化：兼性厌氧微生物，最适生长温度 35-37℃（适配人体肠道生理环境），最适 pH 值 6.8-7.4，对营养要求低，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中均可快速生长，能耐受含胆盐、煌绿的选择性培养基（如 SS、HE 培养基），且生长不受抑制。生化反应中，氧化酶试验阴性（肠杆菌科典型标志），触酶试验阳性（分解过氧化氢产氧），硝酸盐还原试验阳性（将硝酸盐转化为亚硝酸盐），吲哚试验阴性（不产生吲哚），甲基红试验阳性（发酵葡萄糖产酸），VP 试验阴性（不产乙酰甲基甲醇），尿素酶试验阴性（不分解尿素），赖氨酸脱羧酶试验阳性（分解赖氨酸产胺）；糖类发酵方面，可发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇（产酸产气），不发酵乳糖、蔗糖、阿拉伯糖、棉子糖；毒力特性上，携带肠道侵袭相关核心基因（如 invA、hilA、sopB），具较强肠道上皮细胞黏附与侵袭能力，可引发典型急性胃肠炎症状（腹泻、腹痛、发热），生物膜形成能力中等，在食品基质（如肉类、蛋类）中存活能力较强，是食源性感染研究的理想模型菌株。
培养基：常规培养优先选用营养琼脂或 LB 培养基（满足菌体快速增殖需求，18-24 小时可达对数生长期）；食源性样本（如肉类匀浆、蛋液）或临床样本（如粪便、肠道拭子）分离时，优先使用 SS 选择性培养基（高效抑制杂菌，凸显 H?S 黑斑特征）或 HE 培养基（Hektoen Enteric Agar，增强沙门氏菌分离特异性）；药物敏感性试验需采用 MH 培养基（符合 CLSI 标准，确保药敏结果重复性与准确性）；毒力研究（如细胞侵袭实验）可选用 TSB 液体培养基（培养后菌体活性高，侵袭率稳定）。
操作：固体培养置于 35-37℃恒温培养箱静置 18-24 小时，可形成形态典型的单菌落（SS 培养基需重点观察 H?S 黑斑，避免与志贺氏菌混淆）；液体培养采用 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 16-20 小时，培养后期菌液呈均匀浑浊状，菌浓度可达 10?-10??CFU/mL，且能最大程度保留毒力特性（如对 Caco-2 肠道上皮细胞的侵袭率≥70%）。传代次数建议控制在 5 代以内，温度波动需≤±1℃，避免因传代过多导致鞭毛丢失（影响运动性）、H?S 产生能力减弱或毒力基因表达量下降。
短期（1-2 周）：取培养 18 小时的纯培养菌株（需确认革兰氏阴性、乳糖发酵阴性、H?S 阳性），接种至营养琼脂斜面培养基，35-37℃培养 12 小时后，密封管口置于 4℃冰箱冷藏保存。每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染、H?S 黑斑变淡或在选择性培养基上生长异常，需及时重新接种纯化，防止菌株因低温保存失活或特性改变。
长期（3 年以上）：推荐两种高效保存方法：①冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.8-1.0），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物 + 0.1% 半胱氨酸（增强 H?S 相关酶与毒力蛋白稳定性）的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀，分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-8 年，复苏后毒力特性与生化表型保留率≥95%；②甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接放入 - 80℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便且适合实验室常规保存（需避免反复冻融，每次冻融会导致 10%-15% 菌体失活）。长期保存需每 12 个月复苏一次，复苏后需通过革兰氏染色（确认形态与染色特性）、生化反应验证（如乳糖发酵、H?S 产生）、invA 基因 PCR 检测（验证毒力基因）及肠道细胞侵袭试验，全面验证菌株纯度、生理活性与致病特性，确保后续实验使用效果。
客服1