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ATCC28188红色毛癣菌Trichophyton rubrum

一、基础信息ATCC28188 红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)隶属于子囊菌门毛癣菌属,经 ATCC 多维度标准化鉴定(含 ITS rDNA 基因测序、形态学观察及生理生化验证),为典型皮肤致病性丝状真菌(主要侵袭人类皮肤、甲板,尤其易引发甲癣,偶感染毛发),属于亲人性皮肤癣菌(与 ATCC9533 毛癣菌的亲动物性明确区分)。该菌株

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一、基础信息
ATCC28188 红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)隶属于子囊菌门毛癣菌属,经 ATCC 多维度标准化鉴定(含 ITS rDNA 基因测序、形态学观察及生理生化验证),为典型皮肤致病性丝状真菌(主要侵袭人类皮肤、甲板,尤其易引发甲癣,偶感染毛发),属于亲人性皮肤癣菌(与 ATCC9533 毛癣菌的亲动物性明确区分)。该菌株遗传背景清晰可追溯,长期传代后核心特性(菌丝与孢子形态、角质降解能力、致甲癣活性)稳定无变异,核心特征为丝状真菌、需氧、具皮肤与甲板定植特异性及强致病性。其专属菌株编号可实现实验全流程溯源,是红色毛癣菌皮肤及甲部感染机制研究(如甲板角质降解通路、耐药基因表达机制)、皮肤癣病与甲癣诊断试剂研发、抗真菌药物(尤其甲癣治疗药物)敏感性试验及消毒剂抗真菌效果验证的核心参照菌株,能保障不同实验室间亲人性皮肤致病性真菌相关实验数据的精准比对,尤其适合医学真菌学、皮肤病学(甲癣研究方向)等场景的标准化研究。
二、生物学特征
  1. 形态:典型丝状真菌,显微镜下可见纤细的有隔菌丝(直径 1.5-3μm,较 ATCC9533 毛癣菌的菌丝更细),菌丝分支规则,可形成两种孢子:①大分生孢子:罕见或仅少量形成,呈长棒状或圆柱形,2-4 个细胞组成,大小约 3-5μm×8-15μm,壁薄光滑(与 ATCC9533 毛癣菌的多量大分生孢子区分);②小分生孢子:呈圆形或椭圆形,单细胞,直径 2-3μm,散生于菌丝侧面或顶端(不呈簇状,与 ATCC9533 毛癣菌的成簇小分生孢子明确区分)。在沙堡弱培养基(SDA)上生长缓慢,形成直径 1-3cm 的绒毛状或棉絮状菌落(培养 2-3 周,周期长于 ATCC9533 毛癣菌),初期为白色,后期逐渐变为淡红色至暗红色(因产生水溶性红色色素,菌落背面红色更显著,与 ATCC9533 毛癣菌的淡黄色菌落明确区分);色素可轻微扩散至培养基中(ATCC9533 毛癣菌多无色素扩散),在含放线菌酮的 SDA 培养基上可生长(抑制杂菌);因无运动性、无芽孢,此纤细菌丝、散生小分生孢子、红色菌落是关键鉴别标志。

  1. 生理生化:专性需氧微生物(与 ATCC9533 毛癣菌一致),最适生长温度 25-30℃(适配皮肤表面温度,高于 37℃生长受抑制,与 ATCC9533 毛癣菌温度偏好一致),最适 pH 值 5.5-6.5(偏酸性,与 ATCC9533 毛癣菌一致),对营养要求中等,需在含碳水化合物(如葡萄糖)与蛋白胨的培养基中生长,且对甲板角质的降解能力显著强于 ATCC9533 毛癣菌(致甲癣关键特性)。生化反应中,不进行细菌类生化试验(与 ATCC9533 毛癣菌一致);关键生理特性为:能分解葡萄糖、麦芽糖(产酸不产气,有氧呼吸代谢模式),不分解乳糖、蔗糖(与 ATCC9533 毛癣菌一致);可产生高活性角质酶、几丁质酶(尤其针对甲板角质的降解酶活性突出,与 ATCC9533 毛癣菌的皮肤角质酶偏好区分),毛发穿孔试验阴性(不侵袭毛发,与 ATCC9533 毛癣菌的阳性结果明确区分),尿素酶试验阴性(与 ATCC9533 毛癣菌的阳性结果区分);毒力特性上,携带甲板侵袭相关基因(如角质酶基因 kerB、几丁质酶基因 cht1),对甲板角质细胞黏附与侵袭能力极强,主要引发人类甲癣(灰指甲)、手癣、足癣及体癣,通过接触污染物品(如拖鞋、毛巾)传播(无动物传播途径,与 ATCC9533 毛癣菌的病畜传播区分),无系统性感染风险,且耐药性发生率高于 ATCC9533 毛癣菌(临床治疗难度更大)。

三、培养条件
  1. 培养基:常规培养优先选用沙堡弱培养基(SDA,含葡萄糖、蛋白胨、琼脂,25-30℃培养 14-21 天,周期长于 ATCC9533 毛癣菌的 7-14 天);分离纯化时推荐使用含氯霉素(50μg/mL)的 SDA 培养基(抑制细菌污染,与 ATCC9533 毛癣菌一致);鉴别试验需使用甲屑培养基(含甲板角质提取物,验证甲板降解能力)、尿素培养基(尿素酶试验阴性,辅助区分于 ATCC9533 毛癣菌);抗真菌药物敏感性试验需采用 RPMI 1640 培养基(含 2% 葡萄糖,符合 CLSI 真菌药敏标准,与 ATCC9533 毛癣菌一致),且需延长培养时间至 72-96 小时(因生长缓慢,与 ATCC9533 毛癣菌的 48-72 小时区分)。

  1. 操作:固体培养置于 25-30℃恒温培养箱(需充足氧气,无需 CO?,与 ATCC9533 毛癣菌一致)静置 14-21 天,定期观察菌落颜色变化(重点关注红色色素生成,避免过早判定);液体培养采用 25-30℃、80-100rpm 摇床振荡培养 7-10 天(更低振荡速率,防止纤细菌丝断裂,与 ATCC9533 毛癣菌的 100-120rpm 区分),培养后期菌液呈淡红色浑浊状(含菌丝碎片、孢子及扩散色素,与 ATCC9533 毛癣菌的无色菌液区分),菌浓度以菌丝干重或孢子数计量(10?-10?孢子 /mL,低于 ATCC9533 毛癣菌,因生长更慢),且能最大程度保留甲板角质降解能力。传代次数建议控制在 3 代以内(少于 ATCC9533 毛癣菌的 3-4 代),避免频繁传代导致红色色素生成减少或致甲癣活性减弱,温度波动需≤±1℃。

四、保存条件
  1. 短期(1-3 个月):取培养 14-21 天的纯培养菌株(需确认菌丝形态、散生小分生孢子及红色色素),接种至 SDA 斜面培养基,25℃培养 7 天后,密封管口置于 4℃冰箱冷藏保存(与 ATCC9533 毛癣菌一致)。每 2 周观察一次菌株状态,若发现菌落干燥、污染、红色色素褪色或菌丝发黄,需及时重新接种(25-30℃复壮),防止菌株失活。

  1. 长期(5 年以上):推荐两种高效保存方法(与 ATCC9533 毛癣菌保存逻辑一致,但需适配红色毛癣菌特性):①冷冻干燥保存法:取培养 10-14 天的菌丝孢子混合物(用无菌生理盐水洗脱,过滤获取孢子悬液,因孢子量少需充分收集),与含 10% 脱脂乳 + 5% 蔗糖 + 0.1% 维生素 C(额外保护红色色素合成相关酶)的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀,分装至无菌冷冻管(每管 0.5mL),经 - 40℃预冻 4 小时、-80℃冷冻 12 小时梯度降温后进行冷冻干燥,干燥完成后置于 - 20℃冰箱保存,保存期限可达 5-8 年,复苏后孢子萌发率≥85%(低于 ATCC9533 毛癣菌,因孢子量少);②沙土管保存法:取无菌沙土(沙:土 = 3:1,高温灭菌)装入冷冻管,加入适量孢子悬液(需确保孢子浓度,因红色毛癣菌孢子生成量少),室温晾干后置于 4℃冰箱保存,保存期限 3-5 年,操作简便(需定期检查沙土湿度,避免孢子失活)。长期保存需每 18-24 个月复苏一次(与 ATCC9533 毛癣菌一致),复苏后通过形态学观察(纤细菌丝、散生小分生孢子、红色菌落)、甲屑降解试验、尿素酶试验及甲板角质细胞黏附试验,全面确认菌株纯度、生理活性与致甲癣特性,确保后续实验使用效果。



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