形态与生化：菌体呈短杆状或球杆状，大小（0.6-1.0）μm×（1.0-2.0）μm，两端钝圆，无芽孢，无鞭毛（无运动性，与大肠埃希氏菌等有鞭毛肠道菌形成明显鉴别），多数菌株具厚实荚膜（经荚膜染色后呈明显黏液状，菌落拉丝现象显著）。最适生长温度 35-37℃，兼性厌氧（有氧环境生长更旺盛，菌落形成速度快；无氧时可通过发酵葡萄糖产酸供能），适宜 pH 7.0-7.6；生化特征具属内种间鉴别性：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖均产酸产气，氧化酶阴性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阴性（与产酸克雷伯菌 “吲哚试验阳性” 的核心差异点，是两者鉴别的关键标志），VP 试验阳性，可利用柠檬酸盐作为唯一碳源，不产生硫化氢，这些稳定的生化反应是肺炎克雷伯菌精准鉴别的核心依据，也是与同属其他菌种区分的重要标准。
致病性相关：属于条件致病菌，广泛存在于土壤、水、植物及人类肠道、呼吸道黏膜，是人体正常菌群的组成部分；当机体免疫功能低下（如老年人、慢性肺部疾病患者、重症监护患者）时，可引发多种严重感染，临床常见于呼吸道感染（如肺炎、支气管炎，尤其易导致医院获得性肺炎）、尿路感染（如肾盂肾炎、膀胱炎），还可引发败血症、肝脓肿、腹腔感染等全身性感染，部分高毒力菌株（如荚膜 K1/K2 型）易导致侵袭性感染，致死率较高。ATCC 10031 为非高毒力菌株，无显著耐药基因，毒力特性稳定，主要用于与临床致病肺炎克雷伯菌（如产碳青霉烯酶菌株）的对比研究，及感染检测的阳性对照株。
培养：无需特殊气体环境，常规有氧培养即可。推荐培养基包括：营养琼脂（NA，用于菌株活化与纯培养，菌落呈乳白色、黏液状，表面光滑湿润，直径 2.0-3.5mm，挑取时拉丝长度可达 1-2cm，具典型肺炎克雷伯菌菌落特征）、麦康凯琼脂（MAC，因发酵乳糖，菌落呈粉红色黏液状，直径 1.5-2.5mm，边缘整齐，与非发酵乳糖肠道致病菌区分明显）、伊红美蓝琼脂（EMB，菌落呈紫黑色，中心具微弱金属光泽或无光泽，黏液状质地突出，便于快速识别）、TSB 肉汤（用于增菌培养，37℃振荡培养 18-24 小时后，菌液呈中度至重度浑浊，因荚膜多糖成分导致黏稠度较高，活菌数可达 10^8-10^9 CFU/mL）。37℃培养 16-24 小时后，各类培养基上均形成典型黏液状菌落，满足鉴别与纯化需求，其中 “拉丝试验阳性” 是快速确认该菌株的重要特征。
保存：短期保存（1-4 周）：将活化后的纯菌株接种至营养琼脂斜面，37℃培养 12-16 小时后，密封斜面管口（防止培养基水分流失与杂菌污染，避免黏液状菌落脱水萎缩），置于 4℃冰箱冷藏，期间每 2 周观察 1 次，若出现菌落变色、污染或斜面长霉，需立即重新活化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，菌液需取自新鲜 TSB 肉汤，分装至无菌冻存管，避免反复冻融 —— 反复冻融会破坏荚膜结构与菌株生化特性），或冻干保存（以 10% 脱脂乳为保护剂，冻干过程维持低温干燥，冻干后置于 - 20℃以下环境）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉接入 TSB 肉汤，37℃振荡培养 8-10 小时（转速 180-200rpm），待菌液浑浊后转接营养琼脂或麦康凯琼脂纯化，复苏后需通过生化反应（如吲哚试验阴性、乳糖发酵产气）与拉丝试验验证，确保菌株特性未改变。
应用：在临床检测领域，作为肺炎克雷伯菌感染诊断的质控株，用于验证麦康凯琼脂、EMB 等选择性培养基的性能（促生长能力与选择性），校准 AST 实验（纸片扩散法、肉汤稀释法）中头孢类、喹诺酮类、氨基糖苷类等抗菌药物的抑菌圈直径或最低抑菌浓度（MIC），帮助实验室区分肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌，确保感染诊断准确性；在科研领域，用于肺炎克雷伯菌致病机制研究（如荚膜的抗吞噬作用、生物膜形成机制），及新型抗菌药物（针对克雷伯菌属）的体外活性评价，同时可用于肠道菌群互作机制分析（如与益生菌的拮抗作用）；在工业领域，作为微生物检测试剂（如生化鉴定试剂盒、快速核酸检测试纸条）生产企业的出厂质控株，验证试剂性能稳定性；在教学领域，用于微生物学实验，演示 “革兰氏阴性杆菌形态观察”“荚膜染色技术”“生化反应鉴别（如吲哚试验、VP 试验）” 及 “拉丝试验”，帮助学习者掌握肠杆菌科克雷伯菌属不同菌种的核心特性与鉴别方法。
安全：需在生物安全二级（BSL-2）实验室操作（因可引发全身侵袭性感染，且临床株易产生多重耐药性）；涉及菌液移液、离心、平板涂布等可能产生气溶胶的操作时，需在生物安全柜内进行，操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜，避免皮肤接触菌液或吸入含菌气溶胶（黏液状菌液易形成飞沫，增加传播风险）；实验后，所有污染耗材（培养皿、吸头、离心管、接种环）需经 121℃高压灭菌 30 分钟以上（确保彻底杀灭菌株），实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭消毒，再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用 BSL-2 实验室冰箱，冻存管清晰标注 “ATCC 10031 肺炎克雷伯菌（非耐药株）- 吲哚试验阴性”、保存日期及操作人员，严禁与耐药肺炎克雷伯菌（如产 KPC 酶、NDM 酶菌株）或其他致病性肠杆菌混合存放，防止交叉污染与耐药基因扩散。
客服1