生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具条件致病性，可引发免疫低下人群尿路感染、败血症，操作需在生物安全柜内进行，使用后器具需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床感染患者样本，生物学特性与临床及食品污染来源菌株高度一致，能模拟自然场景下的致病与污染表型。
形态与培养特性：革兰氏阴性短杆菌，具肠杆菌科典型特征：
显微镜形态：菌体呈短杆状（0.6-1.0μm×1.5-3.0μm），常单个或成对排列，无芽孢，具周生鞭毛（运动能力稳定），革兰氏染色呈均匀红色（无着色不均）；
培养要求：兼性厌氧，对营养需求低，普通营养琼脂、胰酪大豆琼脂（TSA）、麦康凯琼脂均可生长，最适温度 35-37℃，生长速度快（18-24 小时形成明显菌落），可耐受 4-45℃温度范围（适配食品冷藏与人体环境）；
菌落形态：TSA 平板上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的乳白色不透明菌落（直径 2-3mm）；麦康凯琼脂上因发酵乳糖产酸，菌落呈鲜艳粉红色（区别于不发酵乳糖的沙门氏菌）；在伊红美蓝琼脂（EMB）上，菌落呈紫黑色且略带金属光泽（弱于大肠杆菌，可辅助鉴别）。
生化与耐药特性：生化反应具物种特异性，是鉴别核心：氧化酶阴性、触酶阳性，IMViC 试验结果为 “-+++”（吲哚阴性、甲基红阴性、V-P 阳性、柠檬酸盐利用阳性，与大肠杆菌 “++--” 形成鲜明对比）；能发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气，不产生硫化氢，分解尿素能力弱。核心优势在于耐药表型稳定：经 CLSI 标定，对头孢二代药物（头孢呋辛）敏感，对部分头孢三代药物（头孢曲松）中度敏感，对喹诺酮类（环丙沙星）敏感，MIC 值明确（如环丙沙星 MIC 0.12-0.5μg/mL），同时对 β- 内酰胺酶抑制剂复方制剂（阿莫西林 / 克拉维酸）敏感，是临床 AST 质控的可靠参照。
未开封状态：以冻干粉（真空密封包装，含 10^7-10^8 CFU / 支，含肠杆菌专用保护剂）或标准化甘油菌悬液（20% 甘油，10^6 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期储存（超过 1 年）建议放入 - 80℃冰箱，严禁反复冻融（反复冻融会使活菌率下降 60% 以上，破坏耐药与生化特性），保质期以 ATCC 官方标注为准，通常为 3 年；
甘油菌悬液：直接置于 - 80℃冷冻保存，不可室温或冷藏放置（室温暴露 30 分钟可导致菌体活力下降 40%），保质期 2 年，解冻后需一次性使用，剩余菌液需灭菌后丢弃，不可再次冷冻。
复苏后状态：复苏菌液（TSB 肉汤培养）需 2-8℃冷藏保存，建议 5 天内使用完毕（代谢活跃，长期冷藏易积累代谢废物影响表型）；复苏后的斜面培养物（TSA 斜面）需 2-8℃冷藏保存，建议 2 周内传代一次，传代时需使用无抗菌药物的新鲜培养基（避免药物残留诱导耐药性变化），使用前需通过涂片镜检（确认菌体形态正常、无杂菌）及 V-P 试验（验证阳性结果），确保菌株特性符合实验要求。
复苏操作：
冻干粉复苏：无菌环境下（生物安全柜内），向冻干粉中加入 1mL 无菌 TSB 肉汤，轻轻吹吸 5-6 次使粉末完全溶解（避免产生气泡），转移至无菌试管，37℃培养箱振荡培养（180rpm）12-16 小时；待菌液呈均匀浑浊状（OD600 值约 0.6-0.8，处于对数生长期，耐药表型最稳定）、镜检可见典型短杆菌时，即可用于实验；
甘油菌复苏：从 - 80℃取出后立即 37℃水浴解冻，用无菌枪头吸取 100μL 菌液接种至含 5mL TSB 肉汤的无菌试管中，37℃振荡培养 12-16 小时，待菌液浑浊后使用，无需再次稀释（浓度已标准化，适配药敏与污染检测实验）。
传代培养：在生物安全柜内，用无菌接种环蘸取少量复苏菌液，在 TSA 平板上分区划线（确保单菌落分离，便于纯化菌株），37℃培养 18-24 小时；待平板形成单菌落后，挑取形态典型（圆形、乳白色、光滑）的单菌落，可直接用于实验，或转接至 TSA 斜面培养基，37℃培养 24 小时后，2-8℃冷藏保存；传代次数严格控制在 4 代以内（避免长期传代导致生化特性或耐药表型漂移），每次传代后需通过 V-P 试验验证菌株特性，确保质量。
应用操作：
临床 AST 质控：作为 CLSI 推荐的肠杆菌科药敏质控菌株，用于验证全自动药敏分析仪（VITEK 2、BD Phoenix）、药敏试纸条的准确性，如确认头孢曲松、环丙沙星的 MIC 值在标准范围，偏离则需校准设备，为临床霍氏肠杆菌感染合理用药提供参照；
食品污染检测：用于乳制品、果蔬中肠杆菌污染检测方法的验证，评估麦康凯琼脂、实时荧光 PCR 检测的特异性与灵敏度，通过模拟污染实验（将菌株添加至无菌食品样本），验证检测流程可靠性，保障食品安全；
鉴定方法校准：作为阳性对照，校准生化鉴定试剂盒（如 API 20E）、微生物质谱检测系统对霍氏肠杆菌的鉴定能力，辅助区分肠杆菌科近缘菌（如阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌），避免鉴定失误；
科研教学：用于肠杆菌耐药机制研究（如 β- 内酰胺酶基因筛选），及微生物教学中肠杆菌科生化反应演示，帮助学习者掌握霍氏肠杆菌与其他肠道菌的鉴别要点。
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