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ATCC15442铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa

一、菌种基础信息中文名称:铜绿假单胞菌拉丁学名:Pseudomonas aeruginosa标准编号:ATCC15442产品形式:冻干菌体(含脱脂乳 - 葡萄糖 - 镁盐 - 毒素保护剂,保留强产毒能力与急性感染相关活性,维持生化反应稳定性,复苏率≥85%)安全等级:2 级(临床急性致病性菌株,主要分离自人类急性肺炎、败血症患者样本,免疫功能正

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一、菌种基础信息
  • 中文名称:铜绿假单胞菌

  • 拉丁学名:Pseudomonas aeruginosa

  • 标准编号:ATCC15442

  • 产品形式:冻干菌体(含脱脂乳 - 葡萄糖 - 镁盐 - 毒素保护剂,保留强产毒能力与急性感染相关活性,维持生化反应稳定性,复苏率≥85%)

  • 安全等级:2 级(临床急性致病性菌株,主要分离自人类急性肺炎、败血症患者样本,免疫功能正常人群也可能因创伤感染引发急性症状,无多重耐药性,需在 BSL-2 实验室规范操作)

  • 模式菌株:非模式菌株,是铜绿假单胞菌中急性感染关联的代表性菌株,因产毒能力强、致病性显著,为急性感染机制研究、抗毒素药物筛选的核心参照菌株

  • 分类地位:隶属于假单胞菌科、假单胞菌属,革兰氏阴性杆菌,需氧,在临床急性感染研究、毒力因子分析及抗感染急救药物研发中具有重要应用价值。

二、核心生物学特性
  1. 形态与生理:

  • 菌落:营养琼脂上 35-37℃培养 24h,呈 “非黏液型深绿蓝色菌落”(区别于 ATCC19429 的半黏液型,表面干燥无黏液,无拉丝现象),直径 1.8-2.2mm(大于 ATCC19429 的 1.6-2.0mm);血琼脂上产生强 β- 溶血(溶血范围直径 4.0-4.5mm,显著宽于 ATCC19429 的 3.0-3.5mm,体现急性感染菌株的强溶血活性);不发酵葡萄糖(氧化型代谢,与 ATCC19429 一致),利用柠檬酸盐能力强(24-26h 内使培养基变色,快于 ATCC19429 的 30-32h,代谢活性更高)。

  • 菌体:革兰氏阴性杆菌(0.6-1.0μm×1.6-3.0μm,略大于 ATCC19429);无芽孢,有 2-3 根极生鞭毛(运动性强于 ATCC19429,液体培养中扩散迅速,呈均匀浑浊);氧化酶阳性、触酶阳性(反应结果即时显强阳性,无延迟,与 ATCC19429 一致);产绿脓素与荧光素能力极强(培养基深绿蓝色浓郁,紫外灯下荧光强度显著高于 ATCC19429,色素合成量是其 1.5 倍以上);不产生硫化氢,吲哚试验阴性(与 ATCC19429 一致);无耐药基因(对庆大霉素、头孢他啶、亚胺培南、左氧氟沙星均敏感,仅对氨苄西林耐药,耐药谱与 ATCC19429 一致,但毒力因子表达量更高)。

  • 特性:严格需氧(与 ATCC19429 一致),最适生长温度 35-37℃(适配人体体温,生长速率快于 ATCC19429,24h 菌落直径增长比其多 0.2-0.3mm);生长 pH 5.0-8.8(与 ATCC19429 一致);生物膜形成能力弱(72h 仅形成松散薄生物膜,抗药物渗透能力显著弱于 ATCC19429,贴合急性感染 “快速侵袭、少生物膜” 特征);毒力因子表达量高(外毒素 A、弹性蛋白酶产量是 ATCC19429 的 2-3 倍,体外对上皮细胞损伤率达 80% 以上,远高于 ATCC19429 的 40%)。

三、培养与保存
  • 培养:用临床急性感染菌专用培养基(如血琼脂、营养丰富型 LB 培养基),35±1℃有氧培养 24±2h(培养条件无需严格标准化,适配临床急性感染样本检测场景,区别于 ATCC27853 的严格质控参数);液体培养用营养肉汤(添加 0.1% 葡萄糖 + 0.05% 镁盐,诱导毒力因子表达),35℃振荡培养(160rpm,适配强运动性)16-18h,菌体浓度达(1.0±0.1)×10?CFU/mL(浓度高于 ATCC19429 的(9.0±1.0)×10?CFU/mL,生长速率更快),菌液呈深绿蓝色均匀浑浊(无黏液、无沉淀)。

  • 保存:冻干品 2-8℃保存 3 年(有效期短于 ATCC19429 的 4 年,因毒力因子易失活);复苏后斜面 4℃保存 1 个月(稳定性弱于 ATCC19429 的 1.5 个月,需缩短继代间隔),每 2 周继代 1 次(连续继代 3 次后需验证毒力活性,继代次数少于 ATCC19429 的 4 次);长期液氮冷冻(15% 甘油 + 0.1% 镁盐 + 0.02% 毒素保护剂,按 1mL / 支分装),有效期 2-3 年,产色素能力、毒力活性保留率≥80%(低于 ATCC19429 的 85%)。

四、应用与安全
  • 应用:临床急性感染机制研究(分析外毒素 A、弹性蛋白酶等毒力因子在急性侵袭中的作用,适配急性肺炎、败血症模型);抗毒力药物筛选(作为强毒力菌株,评估药物对毒力因子的抑制效果,区别于 ATCC19429 的 “抗生物膜药物筛选” 定位);毒力因子检测方法验证(作为毒力因子定量检测的阳性对照,校准检测试剂灵敏度);急性感染体外模型构建(用于体外模拟急性肺部感染、血液侵袭环境,测试急救药物的快速抑菌效果)。

  • 安全:BSL-2 实验室生物安全柜内操作,需佩戴护目镜(防范高毒力菌株气溶胶引发的黏膜感染,防护等级略高于 ATCC19429);使用一次性接种器具(避免交叉污染,因毒力强,污染风险高于 ATCC19429);实验废弃物 121℃高压灭菌 30min 即可(无需延长灭菌时间);若发生菌液泄漏,用 2000mg/L 含氯消毒剂擦拭处理(浓度高于 ATCC19429 的 1500mg/L);暴露者需密切监测体温、呼吸道症状(如高热、剧烈咳嗽),24h 内无异常方可排除风险,无耐药基因扩散风险,适配临床急性感染研究、急救药物研发场景。



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