中文名称:副拟杆菌
拉丁学名:Parabacteroides distasonis
标准编号:ATCC BAA-1295
产品形式:冻干菌体(含脱脂乳 - 半胱氨酸 - 维生素 K - 血红素复合保护剂,适配严格厌氧菌活性维持,保留肠道定植相关代谢特性,复苏率≥80%)
安全等级:1 级(人体肠道正常菌群菌株,主要分离自健康人粪便样本,无临床致病性,仅在肠道微生态失衡时可能间接参与代谢相关疾病,BSL-1 实验室厌氧环境下常规操作即可)
模式菌株:非模式菌株,是副拟杆菌属中肠道微生态研究的代表性菌株,因代谢功能丰富、与宿主健康关联明确,为肠道菌群互作研究、代谢疾病机制探索的核心参照菌株
分类地位:隶属于拟杆菌门、副拟杆菌属,革兰氏阴性杆菌,严格厌氧,在肠道微生态学、人体代谢研究及益生菌研发中具有重要应用价值。
形态与生理:
菌落:厌氧血琼脂(含维生素 K、血红素)上 37℃厌氧培养 48-72h(需严格厌氧环境,区别于 ATCC 15442 的需氧培养),呈 “圆形乳白色菌落”(区别于 ATCC 15442 的深绿蓝色菌落),直径 1.0-1.5mm,表面光滑、边缘整齐,质地柔软;血琼脂上无溶血(与 ATCC 15442 的强 β- 溶血差异显著);可发酵多种糖类(如葡萄糖、乳糖、蔗糖,产酸产气,与 ATCC 15442 的不发酵葡萄糖特性完全相反),能利用黏蛋白、果胶等复杂碳水化合物(肠道菌群特有的代谢能力,ATCC 15442 无此功能)。
菌体:革兰氏阴性杆菌(0.8-1.2μm×1.5-3.0μm,略大于 ATCC 15442),无芽孢、无鞭毛(不运动,与 ATCC 15442 的强运动性差异显著);氧化酶阴性、触酶阴性(与 ATCC 15442 的触酶阳性差异显著);产生短链脂肪酸(SCFAs)(主要代谢产物为乙酸、丙酸,占总代谢产物的 60% 以上,对宿主肠道健康至关重要,ATCC 15442 无此代谢产物);不产生毒素与色素(培养基无颜色变化,与 ATCC 15442 的强产色素特性差异显著);无耐药基因(对临床常用抗生素敏感,无耐药表型,与 ATCC 15442 的氨苄西林耐药谱差异显著)。
特性:严格厌氧(氧分压>0.5% 即抑制生长,与 ATCC 15442 的严格需氧特性完全相反);最适生长温度 37℃(适配人体肠道温度,与 ATCC 15442 一致);生长 pH 6.5-7.5(偏中性,适配肠道内环境,ATCC 15442 的耐酸耐碱范围更广);肠道定植能力强(可通过表面黏附蛋白结合肠道上皮细胞,ATCC 15442 无肠道定植能力);能合成维生素 B12、生物素等必需营养素(肠道菌群的益生功能,ATCC 15442 无此合成能力)。
培养:用肠道厌氧菌专用培养基(如强化梭菌琼脂 + 维生素 K + 血红素),37℃厌氧培养(采用厌氧培养箱或厌氧袋,维持 90% N?、5% H?、5% CO?混合气体环境)48-72h(培养时间远长于 ATCC 15442 的 24h);液体培养用脑心浸液厌氧肉汤(添加 0.5% 半胱氨酸 + 0.001% 维生素 K),37℃静置厌氧培养 48h,菌体浓度达(5.0±1.0)×10?CFU/mL(浓度低于 ATCC 15442),菌液呈乳白色浑浊(无沉淀,因不运动)。
保存:冻干品 4℃密封厌氧保存 3 年(需严格厌氧环境,ATCC 15442 无需厌氧保存);复苏后斜面需置于含厌氧指示剂的厌氧罐中 4℃保存 1 个月(保存时间短于 ATCC 15442 的 3 年),每 2 周继代 1 次(频繁继代以维持厌氧活性);长期液氮冷冻(15% 甘油 + 0.5% 半胱氨酸 + 0.001% 维生素 K,厌氧条件下分装),有效期 2-3 年,肠道代谢特性与厌氧活性保留率≥80%。
应用:肠道微生态研究(分析其与其他肠道菌群的互作关系,评估微生态失衡对宿主健康的影响);代谢疾病机制探索(研究其短链脂肪酸代谢、碳水化合物分解功能与肥胖、糖尿病等代谢疾病的关联);益生菌研发(筛选其益生功能菌株,开发调节肠道微生态的制剂);肠道体外模型构建(用于模拟人体肠道环境,测试食品、药物对肠道菌群的影响,ATCC 15442 无此应用场景)。
安全:BSL-1 实验室厌氧生物安全柜或厌氧培养箱内操作(需防范氧气接触导致菌株失活,无需防护致病性);废弃物 121℃高压灭菌 30min 即可(厌氧菌株灭菌要求与需氧菌一致);泄漏后无需特殊消毒(暴露于空气后菌株快速失活,无感染风险,区别于 ATCC 15442 的泄漏处理);暴露者无需医学监测,无致病风险与耐药基因扩散问题,适配肠道微生态、代谢研究及益生菌研发场景。


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