ATCC 27853 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）产品说明
一、菌株基本信息
ATCC 27853 是美国典型培养物保藏中心（ATCC）收录的标准铜绿假单胞菌菌株，获世界微生物菌种保藏中心联合会（WDCM）编号 WDCM 00025，属变形菌门假单胞菌科假单胞菌属，为革兰氏阴性需氧杆菌。其生物学特性经国际标准化组织（ISO）及临床实验室标准化协会（CLSI）认证，是全球临床抗菌药物敏感性试验（AST）的 “金标准” 参考株，广泛用于医院感染诊断质控、抗生素体外活性校准及检测试剂性能验证，在临床医学（感染防控）、微生物检测标准化及药物研发领域实用价值无可替代。
二、核心特性
菌体呈直杆状或微弯曲，直径 0.5-1.0μm、长 1.5-5.0μm，无芽孢，具 1-3 根极生鞭毛（运动性强，显微镜下呈活泼穿梭状运动），部分菌株有薄荚膜，革兰氏染色阴性（严格控制脱色时间 10-15 秒，避免因细胞壁结构特性导致假阳性）。最适生长温度 35℃，可在 42℃生长（与假单胞菌属其他菌种如荧光假单胞菌的核心鉴别点），专性需氧，营养需求极低，在普通培养基、甚至含低浓度抗生素的培养基中仍可生长；不发酵葡萄糖（通过氧化途径利用葡萄糖产酸，O/F 试验呈氧化型），氧化酶阳性（滴加 1% 二甲基对苯二胺试剂后 5-10 秒内呈深紫色，反应迅速），触酶阳性，能稳定产生绿脓素（使培养基呈蓝绿色）和荧光素（紫外灯下显黄绿色荧光，为该菌标志性代谢特征），可分解尿素、不分解乳糖，生化反应高度标准化，CLSI 明确将其生化表型作为铜绿假单胞菌鉴定的 “参照模板”，能与假单胞菌属所有近缘菌种精准区分。
属医院感染高风险条件致病菌，广泛存在于医院环境（如呼吸机管路、导尿管、烧伤创面敷料）及自然环境（土壤、水体）中，尤其易感染免疫缺陷人群（如肿瘤患者、ICU 患者、烧伤患者），可引发肺炎、尿路感染、败血症及烧伤创面感染等严重疾�。黄涠远嘀挚股氐墓逃忻舾行砸驯� CLSI 明确界定（如对碳青霉烯类、头孢类、氨基糖苷类敏感），无天然耐药性，是验证临床分离株耐药表型的 “基准对照”。该菌株携带 lasR/rhlR 群体感应调控系统、exoU/exoY 毒力基因（毒力表型稳定可控），且基因组序列已完全解析，是研究铜绿假单胞菌致病机制与耐药进化的理想模式株。
三、培养与保存
需严格遵循标准化培养流程，推荐使用：cetrimide 琼脂（选择性培养基，含十六烷基三甲基溴化铵，抑制杂菌同时促进绿脓素产生，菌落呈典型蓝绿色，直径 1.5-2.0mm）、营养琼脂（观察菌落形态，圆形、边缘不整齐、表面湿润有金属光泽，培养 24 小时后色素特征最明显）、Mueller-Hinton（MH）琼脂（AST 专用培养基，需确保培养基厚度 4±0.5mm，保证药敏结果重复性）。35℃需氧培养 18-24 小时，活菌数稳定维持在 10^8-10^9 CFU/mL，且菌落形态、色素产量及生化特性无批次差异。短期保存需将 MH 琼脂斜面菌株置于 4℃密封冷藏（1-2 周，避免反复冻融导致菌体活性波动），长期保存需采用 - 80℃甘油冷冻法（20% 无菌甘油 + MH 肉汤保护剂，梯度降温至 - 80℃，减少冰晶对菌体损伤）或冻干保存（1 年以上，冻干后置于 - 20℃以下干燥避光环境，密封防吸潮，复苏后活菌回收率需≥90%）；复苏后必须通过三项关键验证：①绿脓素与荧光素产生（确保代谢表型正常）、②氧化酶试验（验证生化特性）、③对头孢他啶的敏感性（MIC 值需符合 CLSI 标准范围，确保药敏基准地位）。
四、应用与安全
应用上，其核心价值在于 AST 标准化：①作为 CLSI、EUCAST（欧洲抗菌药物敏感性试验委员会）推荐的 “药敏质控金标准”，用于校准碳青霉烯类（亚胺培南 MIC 1-4μg/mL）、头孢类（头孢他啶 MIC 0.5-2μg/mL）、氨基糖苷类（阿米卡星 MIC 2-8μg/mL）等 10 余类抗生素的 MIC 判读范围，确保全球临床实验室药敏结果可比；②用于验证 AST 检测试剂（如药敏纸片、自动化药敏仪）的准确性，是试剂上市前注册审批的强制对照株；③辅助区分临床分离株的 “固有耐药” 与 “获得性耐药”，为耐药机制研究提供基准参照。安全方面，属医院感染重点防控致病菌，需在 BSL-2 实验室操作，气溶胶相关操作（如菌液稀释、平板涂布）必须在二级生物安全柜内进行，操作人员需佩戴 N95 口罩、防护服及无菌手套；污染耗材需 121℃高压灭菌 60 分钟（含菌株的废液需先加 1% 含氯消毒剂处理 30 分钟，确保菌体完全灭活）；菌株需单独存放于双锁生物安全冰箱，标注 “ATCC 27853 铜绿假单胞菌（WDCM 00025）- AST 国际标准株，医院感染高风险致病菌” 警示信息，且需建立菌株领用、使用、销毁的全流程台账，严防实验室感染及菌株滥用。
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