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NCIMB12702log4金黄色葡萄球菌亚种金黄色葡萄球菌

NCIMB 12702 log4 金黄色葡萄球菌亚种金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus subsp. aureus)WDCM 00034 产品说明一、菌株核心价值(适配实际场景)作为获 WDCM 00034 认证的英国标准菌株,核心优势是稳定的肠毒素产毒能力、非 MRSA 耐药表型与 log4(约 10000 CFU / 单位)高浓度质控能力,适配《食品安全国家标准 食品微

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NCIMB 12702 log4 金黄色葡萄球菌亚种金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus subsp. aureus)WDCM 00034 产品说明

一、菌株核心价值(适配实际场景)

作为获 WDCM 00034 认证的英国标准菌株,核心优势是稳定的肠毒素产毒能力、非 MRSA 耐药表型与 log4(约 10000 CFU / 单位)高浓度质控能力,适配《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10-2022)及欧盟 EN ISO 6888 标准,常作为高盐食品(腌肉、酱菜)污染检测的阳性对照 —— 其在 10% NaCl 环境中仍能稳定生长(37℃培养 24 小时浓度维持 log3.8~4.0 CFU / 单位),可精准模拟高盐加工食品的实际污染场景。在食品中毒溯源领域,能稳定产生 A 型、B 型肠毒素(每毫升菌液毒素浓度 50~80ng,经 WDCM 认证),可作为肠毒素检测试剂(ELISA、胶体金法)的标准品,助力中毒事件快速定位污染源;与 ATCC700699(MRSA 菌株)不同,该菌株对 β- 内酰胺类药物敏感,也可用于普通金黄色葡萄球菌感染的临床药敏试验质控,填补 MRSA 菌株在非耐药菌研究中的应用空白。

二、培养与复苏要点

推荐 Baird-Parker 琼脂(选择性培养基),典型菌落呈黑色、有金属光泽,周围环绕透明圈(与 ATCC700699 在血琼脂上的金黄色 β- 溶血菌落形态互补,核心鉴别点为培养基适配性),兼性厌氧培养(与 ATCC700699 一致)。冻干菌粉用胰酪大豆胨肉汤(TSB)溶解,37℃振荡培养(180rpm)8~10 小时(log4 浓度需充分增殖,生长速度与 ATCC700699 相近)。浓度校准采用 10 倍梯度稀释至 10??、10??,取 0.1mL 涂布 Baird-Parker 琼脂,37℃培养 24~48 小时计数,误差超 ±0.1 log 需排查振荡转速不足(低于 180rpm 易导致菌体供氧不足)或稀释时吸管交叉污染。生化验证:触酶阳性、发酵甘露醇(与表皮葡萄球菌鉴别,与 ATCC700699 一致),同时需通过头孢西丁纸片扩散法确认非 MRSA 特性(抑菌环直径>21mm,与 ATCC700699 的≤21mm 形成核心耐药性鉴别);若需验证产毒能力,可接种含 10% 脱脂乳的 TSB,37℃培养 48 小时后取上清液,用肠毒素 ELISA 试剂盒检测,吸光度值≥阳性对照 80% 即为合格。

三、安全管控与存储

属 BSL-2 级菌(因产肠毒素具潜在致病性,与 ATCC700699 管控等级一致,但风险点不同 —— 前者侧重肠毒素中毒,后者侧重耐药菌感染),需在生物安全柜内操作,人员穿防护服、戴 N95 口罩及无菌手套(避免吸入菌体气溶胶或接触肠毒素)。含菌培养物 121℃高压灭菌 30 分钟(需彻底灭活肠毒素,与 ATCC700699 灭活毒力因子的时长一致),含肠毒素的上清液需先加等量 2% 氢氧化钠溶液(室温静置 30 分钟破坏毒素结构)再灭菌;耗材灭菌后按医疗有害废弃物处理。长期保存选冻干法(含 12% 脱脂乳 - 8% 蔗糖保护剂,蔗糖可增强肠毒素稳定性,与 ATCC700699 的保护剂配方一致),4℃干燥避光存放,保质期 5 年(因 WDCM 认证菌株稳定性更优,比普通菌株长 1~2 年);-80℃冷冻需将对数期菌液与 50% 无菌甘油按 1:1 混合(甘油终浓度 25%),快速冷冻避免反复冻融(反复冻融会导致肠毒素表达量下降,与 ATCC700699 的耐药基因稳定性风险不同)。存储时单独存放于双锁生物安全冰箱,标签注明 “金黄色葡萄球菌(NCIMB12702,WDCM 00034,非 MRSA)log4 浓度”,实行双人双锁领用制度,记录需额外注明 “肠毒素检测用途” 或 “食品污染模拟用途”,确保菌株流向与应用场景匹配,严防肠毒素泄漏引发安全事故。


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