ATCC 9997 肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具基础研究与常规质控适配性，无高毒力基因与多重耐药基因携带，致病性较弱（主要引发轻微呼吸道或泌尿道感染，多见于免疫力极低人群），操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床普通呼吸道感染患者咽拭子样本，生物学特性代表肺炎克雷伯菌的经典野生型表型，其生化反应、菌落形态及药敏特征均符合肠杆菌科细菌基础研究的 “标准模板” 要求，适配各类基础实验与常规质控场景，尤其适合新手操作与教学培训。
形态与培养特性：革兰氏阴性短杆菌，具经典肺炎克雷伯菌形态特征与常规培养适配性：
显微镜形态：菌体呈短杆状（0.5-1.0μm×1.5-2.4μm），大小均一性高（变异系数≤7%，符合基础研究对菌株均一性的要求），单个或成对排列（呈 “双球状” 聚集的比例稳定在 25%-35%，可作为形态观察教学的典型特征），无芽孢，无鞭毛（动力试验 100% 阴性，是与肠杆菌属、柠檬酸杆菌属等动力阳性菌株的核心鉴别点），革兰氏染色呈均匀深红色（染色效果稳定，25-55 秒内不易脱色，适配基础实验室常规染色操作），荚膜染色可见中等厚度荚膜（荚膜厚度约 0.5-0.9μm，厚度适中，既便于观察荚膜结构，又不会因过厚影响菌体形态识别，是荚膜染色教学的理想样本）；
培养要求：兼性厌氧，无需特殊培养环境与添加剂（在普通空气或 5% CO?环境中生长差异≤8%，适配基础实验室有限的培养条件），最适培养基为营养琼脂、麦康凯琼脂及伊红美蓝琼脂（EMB），最适温度 35-37℃（温度波动 ±1.5℃时，生长速率变化≤10%，适配基础实验室温度控制精度），生长速度快（16-22 小时形成清晰菌落，适配基础实验快速获得结果的需求），核心特征为常规培养普适性（在各类基础培养基上均能正常生长，无需耐药筛选或营养强化，可用于培养基质量监控实验）；
菌落形态：营养琼脂上呈圆形、表面光滑黏稠、边缘整齐的乳白色菌落（直径 1.2-1.8mm），质地柔软，挑取时拉丝长度稳定在 2.0-3.5cm（拉丝现象典型，是肺炎克雷伯菌肉眼识别的标志性特征，适合菌落形态教学）；麦康凯琼脂上呈粉红色菌落，边缘规则，无扩散现象；EMB 琼脂上呈紫黑色、中心带微弱金属光泽的菌落（光泽度适中，区别于大肠埃希菌的强金属光泽与阴沟肠杆菌的无光泽）；无溶血现象（接种绵羊血琼脂无溶血环，可用于区分溶血与非溶血革兰氏阴性杆菌）；菌落形态典型且稳定，是基础实验室鉴别肺炎克雷伯菌与其他肠杆菌科菌株的理想参照。
生化与药敏特性：生化反应具经典肺炎克雷伯菌特征，药敏谱符合敏感株标准，适配基础研究与常规 AST 校准：
生化特性：氧化酶阴性、触酶阳性（阳性反应快速，10-18 秒内出现气泡，适合生化反应快速判定教学），发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气（发酵速率稳定，24 小时内均可观察到明显产酸产气现象，无延迟反应），不发酵麦芽糖、肌醇、山梨醇（与产酸克雷伯菌、高毒力肺炎克雷伯菌的生化差异显著，是精细鉴别教学的关键特征），VP 试验强阳性，甲基红试验阴性，枸橼酸盐利用试验阳性（48 小时内 100% 阳性，无假阴性，可作为生化鉴定卡性能验证的 “标准对照”），生化反应结果完全符合《伯杰细菌鉴定手册》中肺炎克雷伯菌的经典描述，是生化鉴定教学与方法建立的理想菌株；
药敏特性：核心优势在于敏感株标准药敏谱，仅对青霉素类药物（氨苄西林、青霉素 G）天然耐药（氨苄西林 MIC≥32μg/mL，符合肺炎克雷伯菌天然耐药特性），对临床常用的头孢菌素类（头孢曲松、头孢呋辛）、氟喹诺酮类（左氧氟沙星、环丙沙星）、氨基糖苷类（庆大霉素、阿米卡星）及含 β- 内酰胺酶抑制剂的复方制剂（阿莫西林 / 克拉维酸、哌拉西林 / 他唑巴坦）均敏感，MIC 值高度标准化（头孢曲松 MIC 0.12-0.5μg/mL，左氧氟沙星 MIC 0.25-1μg/mL），无任何耐药基因携带（区别于 ATCC700603 等耐药株），是基础实验室建立 AST 方法、验证药敏试剂准确性及教学演示敏感株药敏结果的 “金标准参照”，同时其无耐药背景的特性，也适合用于抗菌药物体外抑菌活性筛选的阴性对照实验。
三、储存环境
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^7-10^8 CFU / 支，添加荚膜保护剂与常规菌株稳定剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^6 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存（可保存 2.5 年，因无耐药基因与高毒力基因，表型稳定性显著高于耐药株与高毒力株），长期（>2.5 年）建议置于 - 80℃储存（进一步延长保质期，减少表型漂移风险），严禁反复冻融（冻融次数≥3 次时，活菌率下降≥50%，但荚膜结构与生化特性仍可维持基本稳定，区别于冻融后易失活的耐药株），保质期 5 年（是肺炎克雷伯菌属中保质期较长的常规菌株，适配基础实验室长期储备需求）；
甘油菌：直接 - 80℃保存（可在 - 20℃短期存放≤2 个月，活力下降≤12%，适配基础实验室短期使用与分装需求），室温暴露 25 分钟致活力下降 35%（暴露耐受性优于耐药株与高毒力株，操作容错率高），保质期 3 年，解冻后可分装为 100-200μL / 支用于短期实验（无耐药基因交叉污染风险，适合基础实验室多人次、多批次使用）。
复苏后状态：复苏菌液（普通营养肉汤培养，无需添加任何诱导剂或抑制剂）2-8℃冷藏 7 天内使用（7 天内生化反应与药敏 MIC 值波动≤1 个稀释度，完全满足基础实验需求）；斜面培养物（营养琼脂斜面）2-8℃冷藏 4 周内传代（传代间隔≥7 天时，表型稳定性最佳），传代操作简单，无需特殊环境控制，使用前需通过三项关键指标验证：①镜检确认菌体大小均一性（变异系数≤10%）；②麦芽糖发酵试验（阴性）；③头孢曲松药敏 MIC 值（0.12-0.5μg/mL），确保表型未漂移，符合常规质控菌株要求。
四、使用方法
复苏操作：基础实验室常规操作流程，生物安全柜内，冻干粉加 1mL 普通营养肉汤溶解，37℃恒温培养箱静态培养 16-22 小时；待菌液 OD600 值稳定在 0.7-0.8（吸光度变异系数≤5%）、镜检见均一短杆状菌体，且接种营养琼脂形成典型拉丝菌落时，通过触酶试验与乳糖发酵试验初步确认特性后即可使用（复苏成功率≥98%，操作步骤少，无需专业技能，适合新手操作与教学演示）。
传代培养：挑取营养琼脂或麦康凯琼脂上的典型单菌落（选择形态最标准、无变异的菌落），划线接种新鲜营养琼脂平板，37℃培养 16-22 小时；斜面保存时，挑取单菌落接种营养琼脂斜面，37℃培养 24 小时后置于 2-8℃冷藏；传代≤6 代（传代次数≥7 代时，仅荚膜厚度略有下降，生化与药敏特性仍稳定，区别于传代后易退化的耐药株），每次传代后需通过 “形态 - 生化” 双重验证：①革兰氏染色与荚膜染色确认形态稳定性；②VP 试验与枸橼酸盐利用试验确认生化一致性，确保菌株始终符合经典肺炎克雷伯菌属性。
应用操作：
基础实验教学：用于微生物学基础实验课程，如革兰氏染色、荚膜染色、菌落形态观察、生化鉴定（氧化酶、触酶、糖发酵试验）及 AST 操作等教学内容，其典型的形态与生化特征可帮助学生快速掌握肺炎克雷伯菌的鉴别要点，同时作为 “已知菌株” 用于学生实操结果的准确性验证；
实验室常规质控：作为基础实验室与临床检验科的日常质控菌株，用于监控培养基质量（如营养琼脂的促生长能力、麦康凯琼脂的选择性与指示剂有效性）、培养环境稳定性（如培养箱温度、CO?浓度）及生化鉴定试剂（如生化反应管、鉴定卡）的性能，确保实验室常规检测结果的可靠性；
基础科研应用：用于肺炎克雷伯菌生理代谢研究（如碳源利用、氮源代谢途径分析）、荚膜合成基础机制研究（如荚膜多糖合成相关基因的初步功能验证），及新型抗菌药物体外抑菌活性筛选的阴性对照（因无耐药背景，可排除耐药基因对药物活性检测的干扰）；
诊断试剂研发初期验证：用于肺炎克雷伯菌诊断试剂（如胶体金抗原试纸、荧光定量 PCR 引物）研发过程中的初期特异性与敏感性验证，其经典表型与基因背景可作为试剂性能初步评估的 “标准样本”，为后续使用临床复杂菌株验证奠定基础。
客服1